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Detecção de Micoplasmas em Culturas Celulares

Ensaios realizados pelo Inmetro são importantes para laboratórios de análises de citotoxicidade e de pesquisas e centros de terapia celular.

Ações Inovadoras

Os laboratórios de Bioengenharia do Inmetro realizam ensaios para detecção de Micoplasmas em Culturas Celulares por Fluorescência por DAPI, Bioluminescência e PCR. Essas duas últimas técnicas têm-se mostrado ser bastante sensíveis na detecção dos micoplasmas.

As culturas celulares utilizadas no meio acadêmico e nos laboratórios públicos e privados que realizam ensaios utilizando células animais apresentam elevado risco de contaminação por micoplasmas. Esses são os menores organismos conhecidos com capacidade de autorreplicação e sua presença nas culturas altera o metabolismo e o comportamento celular, afetando uma ampla gama de parâmetros fisiológicos e bioquímicos. Assim, a utilização de células contaminadas por micoplasmas compromete a confiabilidade dos resultados.

Uso e aplicações

A contaminação de culturas celulares por micoplasmas é de difícil detecção, sendo necessários ensaios específicos e altamente sensíveis para que sejam detectadas até mesmo as células com baixos níveis de contaminação. Assim, mesmo nos laboratórios em que há rotina desses ensaios, se forem utilizados métodos pouco sensíveis, existe a possibilidade da contaminação dessas culturas não sejam detectadas.

Vantagens

Uma vez que a contaminação por micoplasmas pode ter um impacto na análise em células in vitro, na obtenção de bioprodutos de origem celular e na terapia celular, testes para sua detecção tornam-se requisito regulatório importante para garantir a qualidade, a pureza e a segurança de ensaios e produtos. Alguns organismos internacionais já exigem que pelo menos dois ensaios sejam realizados para comprovar a ausência desse contaminante em culturas celulares.

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